1. 将泵头没入新鲜的经超声波脱气的HPLC级流动相中；
2. 将排气阀反时针转2-3圈，用10ml注射器抽，直到出液，排尽管路中的气体；
3. 接通电源，根据色谱柱的不同，逐渐提高流速到设定值，设定最高压力等参数；
4. 开启检测器，根据测定要求设定相关参数；
5. 开启计算机，打开数据工作站；进样，进行分析；
6. 分析完毕，退出工作站，依次关计算机、检测器、泵、电源。
注意事项：
1. 所用流动相必须经过滤、脱气；更换流动相时，要保证两种溶剂的互溶性，如不互溶，要用一种中间溶剂过渡；
2. 使用缓冲溶液时，停泵前要用水冲洗，并冲洗柱塞杆清洗孔；
3. 色谱柱长期不用，要卸下来，选用合适的溶剂存放，存放前要除去杂质，避免机械震动，防止细菌生长；
4. 卤离子可以腐蚀管路和零件，因此尽量避免使用含卤离子的流动相或能生成卤离子的流动相，如果必须使用，分析结束后必须立即使用去离子水清洗整个系统的管路。
